
ssRNA Cyclase 是一種耐熱連接酶,環(huán)狀 RNA 合成試劑盒可催化單鏈DNA(ssDNA)和單鏈RNA(ssRNA)底物的離子分子連接(即環(huán)化)。環(huán)化反應(yīng)中,要求催化底物單鏈 DNA/RNA 具有5’-磷酸基團(tuán)和3’-OH基團(tuán)。
ssRNA Cyclase 能生產(chǎn)用于滾動(dòng)圈復(fù)制或滾動(dòng)圈轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)和下一代測(cè)序的單鏈DNA模板以及生產(chǎn)15~500nt環(huán)狀RNA。
1、吉賽GSPure?Circular RNA Synthesis Kit試劑盒制備環(huán)狀RNA測(cè)試

圖1. 使用吉賽GSPure?Circular RNA Synthesis Kit試劑盒制備環(huán)狀RNA的效果圖。反應(yīng)體系為20 μL,長(zhǎng)度為307 nt的單鏈RNA的終濃度為1 μM,反應(yīng)條件為45℃孵育60 min,隨后取樣用6%尿素變性聚丙烯酰胺凝膠電泳,最終經(jīng)SYBRTM Gold 核酸染料孵育后熒光成像分析。如圖所示,本試劑盒在60 min內(nèi)就可以將85% 以上的5’磷酸化3’羥基的單鏈RNA轉(zhuǎn)化為環(huán)狀RNA。